无菌室（培养室、细菌室、病毒室）规章制度

    无菌室全部操作都应严格遵守相关规定，应在无菌操作室或无菌操作台内进行，整个实验过程中，要严肃、认真养成严格的科学作风。

1  非实验室工作人员进入无菌室未经许可，谢绝入内。

2  进入无菌室之前，严格遵守消毒、更衣制度，实验时严格按照无菌操作规程，以防污染。

3  随手关门，保持无菌室清洁，每次进入无菌室不得多于两人，需要观看实验操作，可在无菌室外观看。

4  操作结束，必须把超净台打扫干净，用 2% 新洁尔灭擦洗一次，常规备用物品放置整齐，然后开紫外线灯照射半小时。

5  无菌室用的物品严格按照规则清洗，与无菌室无关的物品，不得带入无菌室。

6  公共物品用完后要及时消毒，补充备用。

7  无菌室的仪器、设备按使用方法开关，经常检查其性能及工作状态，发现故障及时报告。

8  无菌室每周至少用专用拖布清洁一次，并擦拭仪器、设备表面灰尘。

9  无菌室三天全面消毒一次，以保持无菌状态。

层流室使用规则

1  周五上午打扫卫生。拖地、洗鞋，用 0.1% 新洁尔灭液擦洗桌面和地板，最后用过氧乙酸蒸气消毒，层流室内实验者参加值日。

2  工作前 40 分钟打开室内紫外线灯、超净台风机、超净台紫外线灯消毒，关紫外灯后 20 分钟入室。

3  入室后随手关门，换工作鞋、戴口罩、帽子。

4  室内各门工作鞋固定，换门即换鞋。

5  进层流间前：先从外门进风淋室，风淋室的作用是吹风除尘。待风淋室停机后，从内门进入层流间，切忌风机未停，先打开内门。

6  室内各固定物品用后请归位。

7  配细胞培养液时，室内需连续消毒三天。

8  工作完毕酒精棉球消毒工作台面，紫外线消毒 20 分钟。

9  室内工作时间较长或人多时，工作后需用过氧乙酸蒸气消毒空气。

10 室温超过 30 ℃ 时，中央空调停止前 10 分钟，打开拒式空调（空调定温25℃，定时8小时）。

11 CO2培养箱定时清洁，随时补充发盆中消毒蒸发水（1000ml灭菌去离子水加新洁尔液 5ml ）。

显微操作室规章制度

    为保持显微操作室清洁无菌环境，保证转基因和核移植及相关工作的顺利开展，特制定如下规章制度，望各位严格遵守。

1 、所有进出显微操作室的人员必须严格按照进出无菌室的要求执

行，即着工作服，戴工作帽和口罩，进入时要风淋；

2 、所有进入操作室的人员必须事先申请，获得批准后方能进入；

3 、使用操作室的仪器，必须事先进行培训，培训合格后方能使用

仪器；

4 、所有物品进出操作室必须从传递窗进出；

5 、室内的仪器均精密仪器，请不要随意移动位置；

6 、每次实验废弃物要及及时清理出去，以保证操作室的清洁无菌；

7 、请保持室内的清洁整齐，定期进行全面的清洁消毒工作；

8 、由于操作室有限，每次进入的人员不能太多 ( 最多不能超过

4 人 ) ；

冷 藏 室 管 理 规 定

    为了确保实验室科研、教学工作能力有序进行，强化冻存细胞株及组织的合理利用，防止固有资料无故的浪费、流失。特对本冷藏室做如下规定：

一、本冷藏室内的所有物品 ( 包括仪器、冻存细胞株及组织 ) 由专人负责管理。

二、冷藏室门的钥匙由实验室专人保管，存取冻存细胞及组织需经实验室专人同意。

三、进入冷藏室存取冻存细胞及组织后要及时进行登记。

四、为了保护固有资源，防止冻存细胞及组织日后缺乏，保障有足够的标本能使后来的人使用。凡取出一支细胞者必须冻存三支。否则下次不给支取。

五、如果动用别人细胞株或组织者，一定要经过持有者的同意，否则不可乱用。

六、未经系主任同意，不得私自把本所并存细胞株及组织为外单位所用。如发现私自外借细胞株或组织者按本所有关规定处罚。

七、要保持仪器设备的正常使用经常察看液氮量的多少，及时补添。

八、要保持室内的卫生。

器材洗刷包装及消毒工作规则

一、各种玻璃器材的洗涤和消毒

1 ．新玻璃器材的处理

首先用自来水冲洗表面灰尘，然后再用洗衣粉洗和自来水冲洗，放 2% － 5% 盐酸溶液中浸泡过夜，自来水冲洗 10 次以上，或浸泡自来水中半天，中间换液 4 次以上，吸管用自动冲洗器冲洗 3 小时，经蒸馏水冲洗 3 次，再用无离子水或双蒸水冲洗 3 次，包装，消毒。

2 ．用过玻璃器材的处理

污染的器材必先经煮沸 30min 后浸泡清水中，加洗衣粉，自来水冲洗至少 7 次，沥干水后浸泡硫酸清洁液中过夜，再用自来水冲洗 10 次，蒸馏水冲洗 3 次，无离子水冲洗 3 次，包装，消毒。

3 ．玻璃滤器的处理

新玻璃器先用自来水冲洗表面灰尘，在将滤器放抽滤瓶上，漏筐内加满清洁液，自然滤过后加蒸馏水冲洗至流出液体 pH 与蒸馏水 pH 相同时为止，筐内加满 1N NaOH ，至液体全部滤过后将漏筐内加满蒸馏水自然过滤 3 次，再用无离子水自然滤过 3 次，自然沥干水分，包装，高压消毒 ( 注：禁止干烤 ) ；用过的玻璃滤器从出水口加蒸馏水冲洗除去滤板上的污物，浸泡 2% 次氯酸钠溶液中过夜，自来水冲，再按上述方法处理。

4 ．器材包装

较大的玻璃瓶如三角瓶、盐水瓶等单个用纸盖包装瓶口或用棉塞外加纸盖，小型玻璃器材的包装一般是 10 个一包 ( 青霉素瓶、试管、平皿、吸管等 ) ，并可根据需要包装，有时需要在吸管口加不脱脂棉花。

5 ．消毒

干烤消毒：玻璃器材需干烤 160 ℃ 2 小时；

高压消毒： 10-15 磅 20-30 分钟 ( 或 101.3Kpa 或 121.3 ℃ ) 。

消毒有效时间：经消毒过的器材只能在一周内使用，超过一周者需要重新消毒后才能再用。

注意事项：高压消毒时瓶口一定用棉塞、纱布或保鲜纸包好，严禁用玻璃塞和胶塞。

二、塑料器皿清洗

自来水充分浸泡→冲洗→浸泡过夜→自来水冲洗→ 2%-5% 盐酸浸泡 30min →自来水冲洗→蒸馏水漂洗 3 次→晾干→紫外线照射 30min( 或先用 75% 酒精浸泡、擦拭，再用紫外线照射 30min) 。凡能耐热的塑料器皿，最好经 101.3Kpa(121.3 ℃ ) 高压灭菌。

三、胶塞等橡胶类处理

1 ．新购置者先经自来水冲洗 → 2%NaOH 煮沸 15min →自来水冲洗→ 2%-5% 盐酸煮沸 15min →自来水冲洗 5 次以上→蒸馏水冲洗 5 次以上→蒸馏水煮沸 10min ，倒掉沸水让余热烘干瓶塞等。或蒸馏水冲洗晾干，整齐摆放于小型金属盒内经 101.3Kpa 高压灭菌。

全自动高压灭菌仪（ SA － 300VA 型）操作程序

1  电源接在 220V ～ 240V 。

2  打开门并注入约 2000ml 蒸馏水或去离子水，将需消毒物品装入篮中。

3  盖上盖子并旋紧螺栓。

4  打开电源开关 POWER 、设定程序：

有包装： 134 ℃消毒 15min ； 121 ℃消毒 30min

无包装： 134 ℃消毒 15min ； 121 ℃消毒 14min

不需要干燥的不要用 DRY 。

5  按下开始开关 START ，机器开始自动工作用。

6  工作完成后自动放气，完成指示灯 COMPCETE （绿灯）亮，如完成指示

灯不亮，消毒失败，请检查后再次运行。

7  开门时，请检查压力指示（没有回零不要开门）。

注 意 ：

1. 缺水灯 LOW WATER 亮时要加水。

2 ．危险灯 ! 亮时，意味着过热和不受控制，迅速切断机器电源，并维修。

3 ．保持垫圈及舱内清洁。

4 ．工作时注意排汽孔。

5 ．有紧急情况压力释放开关（红色开关），当想要中断工作和不受控制时

CrDx-280 型不锈钢手提压力蒸汽灭菌消毒器操作程序

1  堆放消毒的物品应予以妥善包扎，各包之间留有间隙堆放在消毒桶的筛板上。这样可有利于蒸气的穿透，提高灭菌效果。

2  在主体内加入清水升 4 升，使水位一定要超过电热管，连续使用时，必须在每次消毒前补足上述水量，以免因缺水而不能正常工作。

3  将堆好物品的消毒桶放在主体内。然后把盖上的放气软管插入消毒桶内侧的圆槽内。对正盖与主体的螺栓槽，顺序地将相对方位的翼形螺母予以均匀旋紧，使盖与主体密合。

4  将消毒器接上与铭牌标志电压一致的电源，插上电源插座电热管通电开始工作。在加热开始时，应将放气阀的摘子堆至垂直放气方位，使冷空气随着加热由桶内逸去。等有较急的蒸汽喷出是，即将该摘子板回水平"关闭"方位。此时压力表指针应加热而随着逐渐上升，指示出消毒器的压力和温度。

5  当压力到达所需的范围时，开始计算消毒所需时间，并使之维持恒压当达到 0.14 兆帕 124-126 摄氏度消毒时，则安全阀能使之维持恒压。

6  对物品在消毒后要迅速干燥，可在消毒终了时将消毒器内的蒸气通过放气阀予以迅速排出，待压力表指针回复至零位，使物品上残留水蒸气得到蒸发，随着将电源切断停止加热， ( 消毒液体时严禁使用干燥方法。 )

    消毒结束时，必须先将电源切断，停止加热待其冷却，直至压力表指针回复位至零位，再待数分钟后排去余气后，才能将盖开启。

液氮储存箱操作指南（ 7400 系列 ）

一、操作

•  打开仪器背后电源开关，仪器自检。

•  用钥匙打开控制面板锁，仪器进入设定模式。

•  高温报警点设置

•  按 “ High Temp ”键，听到“嘀”声后松手。

•  按“ ↑”或“↓”将面板显示温度调至所需要的温度点，按“ Enter ”键确认。

•  高﹑低液面设置

•  按“ Select Scale ”选择显示尺寸（左边：显示范围 1 -25 英寸 ， 1 英寸 为单位递加。右边：显示范围 2 -7 英寸 ， 1/4 英寸为单位递加。）

•  按 “ High Level ”键，听到“嘀”声后松手。

•  按“ ↑”或“↓”到所要求液面相对应的指示灯点亮（桔黄色）。

•  按“ Enter ”键听到 “嘀”声后表示位置已经储存。

•  同 B-D 步骤设置低液面即可。

二、注意事项

1 、液氮供应压力不可高于 22PSI 。

2 、环境温度不可高于 40 O C ，湿度不可高于 50% 。

3 、存取样品时必须戴防冻手套。

4 、最好使用稳压电源。

荧光定量 PCR 仪 -Mx3000P 简易操作流程

一、开机前的准备

1  确认电源线插头已可靠插入电源插座中

2  电源线接地可靠；

3  接口线两端插头已分别可靠插入 ；

二、荧光定量 PCR 仪简易操作流程

1  将 Mx3000P 电源开关打开，在大约 1 分钟的时间内，仪器将会自检并且能听到滤镜轮转动的声音。打开电脑上的 Mx3000P 软件，确定软件界面右下面的联机标志呈现绿色 。如果不是绿色而是红色，软件会提示 ，这时只需要继续稍等片刻，待仪器自检完成，会自动连接计算 机。

• 
2 在软件的弹出框中选择您要进行的实验类型 。

3  确定卤钨灯已经打开。 ( 绿色 ) 则说明卤钨灯已经打开； （黄色）则说明卤钨灯正在预热； （红色）则说明卤钨灯没有被打开，这时需要用鼠标点击这个标志将光源打开。在卤钨灯已经被打开的情况下，软件界面右下方会显示 （绿色）。

4  最好在仪器与光源预热 20 分钟后开始实验。

5  进入“ Setup ”在“ Plate Setup ”里，对 96 孔板的各孔进行设定。选中需要设定的同一类型的孔，在软件右边的“ well type ”里设定孔的类型，一般的设定如： Standard （标准品）、 NTC （阴性对照）、 unkown （样品）等，并选择正确的通道（ FAM 、 HEX 、 Rox 、 Cy5 ）。如果使用了参考染料，则需要在“ Reference Dye ”里选择参考染料的名称，如： ROX 。对于标准品，需要设定其模板浓度，在“ Standard Quantity ”里输入标准品的浓度，如 1e ＋ 009 。可以选择“ Auto － increment ”来对标准样品孔的浓度进行梯度稀释，如 10 倍梯度稀释，选择“ Auto-increment － 10X ”。在“ Standard Unit ”选择标准样品的浓度单位。再在“ Identify Replicates ”里对样品孔进行数字编号。

6  点击“ Thermal Profile Setup ”，进行 PCR 循环的设定，可以点击各项温度、时间、循环数等参数进行更改，或者用鼠标点击某一步骤并上下拖动来调节温度。删除某一步骤，只需用鼠标点击该步骤使之变为红色，再选择“ Delete ”。如果需要在某一步之后添加步骤，只需要用鼠标点击该步骤使之变红，再选择“ Add － Plateau with Ramp ”。或者点击“ Import ”，可以导入以前设定的 PCR 程序。 代表采集荧光信号， （ END ）代表在这一步结束时采集荧光信号； （ ALL ）代表在这一步的全过程都采集荧光信号，一般用作熔解曲线分析。

7 “ Setup ”结束之后，点击软件界面右上方的“ Run ”。软件界面右下方会出现运行状态显示框“ Run Status ”，点击“ Start ”开始实验，并保存实验结果。在运行过程中可以通过点击“ Add Cycles ”来增加扩增的循环数。还可以选择“ Turn lamp off at end of run ”，在 PCR 运行结束之后软件将自动关闭卤钨灯。

8  在 PCR 运行的过程中可以点击 ，观察样品的实时扩增原始结果。

9  在运行的过程中或者运行结束后，都可以点击“ Analysis ”分析实验结果。点击“ Analysis Selection/Setup ”，选择需要分析的样品孔。点击“ Res μ lts ”，在软件右方“ Area to analyze ”里选择需要呈现的结果方式，如：“ Amplification Plots ”（扩增曲线），“ Standard Curve （标准曲线）”， Text Report （文本报告）等。

10  结果输出方式：将软件打开到要输出的结果或者曲线，点击“ File ”，按照需要选择“ Export text ”或者“ Export to PowerPoint ”等。

荧光显微镜观察 (FL)

1  接通电源，打开主机开关，先在明场下以低倍物镜找到标本。

2  关闭主机明场光源开关，打开荧光供电器开关。

3  旋转荧光滤光片转盘，使荧光滤光片进入光路（ UV 、 B 、 G ）。

4  慢慢打开荧光光闸（ * 荧光切勿直接照射眼睛）。

5  选择要使用的物镜进行详细观察。

•  切勿用手触摸灯箱 , 高温高压。为保护荧光汞灯，延长汞灯使用的寿命，请切勿频繁开关荧光汞灯，每次接通电源使用时间应不少于 30 分钟才可关闭电源，而当电源关闭后要等汞灯完全冷却后方可重新开启，冷却时间要不少于 30 分钟！！

紫外分光光度计基本使用说明

一、核酸 (DNA/RNA) 检测 :

1  打开机器背面的电源开关 , 机器进行自检 ;

此过程约 5 分钟 , 六项参数均显示 PASS , 表示自检通过 ; 若某项显示 FAIL , 需重新自检

2  按需要准备 ( 稀释 ) 样品 ;

待测样品最小量为 100 μ l, 如准备稀释 100 倍液体 , 可在 99 μ l 溶液中 , 加入 1 μ l 待测样品 , 仔细混匀 , 另需一管空白对照 ( 稀释样品的溶液 )

3  按 NUCLEIC ACID 键 , 选择待测样品种类 , 按 ENTER 键确认 ;

如 5.dsDNA 为双链 DNA,6. ssDNA 为单链 DNA;7.RNA 等

4  按 DIL X: 输入稀释倍数 ( 如 100 或 50 等 ), 按 ENTER 键确认 ;

5  用灭菌蒸馏水仔细冲洗比色杯 , 并用吸水纸将液体吸尽 ;

勿用手直接接触比色杯石英面

6  将空白对照品加入比色杯中 , 放入检测槽中 , 关闭盖子 , 按 BLANK 键 ; 可能需要几秒钟 , 检测完毕后 , 系统显示 0.000 μ g/ml

7  取出比色杯 , 用蒸馏水仔细清洗 , 吸尽液体 ;

8  将待测样品加入比色杯中 , 按 READ 键 ; 系统读数 , 屏幕显示样品浓度 ; 可通过按 OPTIONS 键转换观察样品浓度和 260/280 比值 ;

此浓度为检测样品稀释前浓度 , 勿需另行转换 ;

9  如需检测其他样品 , 请重复 setp 7 和 8;

10  为 合理利用仪器 , 检测完毕后 , 请询问其他同事是否有需检测 ;

11  若否 , 请将比色杯小心放入洗涤瓶中 , 按下述步骤正确关闭仪器 .

二、蛋白浓度检测（ Bradford 法）

1  配制染色液：将 100mg 考马斯亮兰 G-250 溶解于 50ml 95% 的乙醇中 , 加入 100ml 85% 的磷酸 , 加水稀释至 1000ml;

2  配置标准蛋白液 : 在 EP 管中加入含 0, 10, 20, 30, 40, 50 μ g 的标准蛋白 , 加水至 60 μ l, 加 3ml 染色液 , 混匀后室温放置 15 分钟 ;

3  配置样品溶液 : 方法同 step 2;

4  打开仪器开关 , 系统进行自检 ;

5  按 PROTEIN ASSAY 键 , 选择 1. Bradford 法进行检测 , 按 ENTER 键确认 ;

6  按 STD CURVE 键 , 制备标准曲线 ;

7  按 UNITS 键选择样品浓度单位 , 如μ g/L 或 mg/L; 按 MORE 键确认 ;

8  按 CREATE TABLE 键 , 按顺序输入标准品的浓度 . 按 ETARY DONE 键确认 ;

9  用灭菌蒸馏水仔细冲洗比色杯 , 并用吸水纸将液体吸尽 ;

勿用手直接接触比色杯石英面

10  将空白对照品加入比色杯中 , 放入检测槽中 , 关闭盖子 , 按 BLANK 键进行系统清零 ;

11  取出比色杯 , 用蒸馏水仔细清洗 , 吸尽液体 ;

12  将标准品按顺序加入比色杯中 , 进行检测 , 每测量新的样品时 , 需同 step 11, 进行清洗 ; 检测完毕后 , 系统自动生成标准曲线 ; 按 ENTRY DONE 键检测待测品 ;

13  输入待测品稀释倍数后 , 同 setp 10, 进行空白检测 ;

14  同 setp 11, 进行待测样品检测 , 系统会自动显示待测品的浓度 , 无需另行转换 ;

15  为合理利用仪器 , 检测完毕后 , 请询问其他同事是否有需检测 ,;

16  若否 , 请将比色杯小心放入洗涤瓶中 , 按下述步骤正确关闭仪器 .

三 . 关机程序

1  操作完毕后 , 请按 EXIT 键 ( 确认点 yes ), 返回主菜单 ;

2  按 MORE 键后 , 选择 SYSTEM CHECKS 键进行系统检测 ;

3  按 LAMP HISTORY 键后 , 按面板上 SETUP 键 ;

4  按 UV LAMP 键后 , 按 LAMP ON 键 , 此时显示 ” LAMP OFF”;

5  按 ENTER 键确认后 , 按 EXIT 退出 ;

关闭电源

组织微阵列操作步骤

（一）组织标本块和 HE 切片制备

    从组织标本块上准确取样是制备组织微阵列的关键。从每一个组织标本块上获得一张 HE 染色切片以指导挑选取样区域，在制作微阵列前最好在相应的 HE 切片上取样区域圈住或将其作上标志，组织标本块应至少 1mm 厚。一般推荐组织标本块厚度为 3 － 4mm 。

（二）受体微阵列块的制备

    制备空白石蜡块以作为组织阵列的受体。将溶化的石蜡（溶化温度为 55-58 ℃ ）倒入一个模子内，将模子的脱水盒放在溶化的石蜡上面，待其冷却后，将模子去掉。一般推荐使用 5 － 10mm 厚的模子以制作受体块。但是，受体组织块必须与供体组织块桥吻合

（三）设计微阵列

    事先设计出微阵列多少标本并根据微阵列块设计出方案是很有用的，一般在微阵列块上设计 100 － 500 个样本。 40mm × 25mm 大小的硎块上可以阵列 1200 个以上样本。多数情况下， 200 － 300 个样本微阵列已足够用了。注意：制作大阵列时，受体组织微阵列块应在阵列过程的中间旋转 180 o 。两个相邻阵列标本中心间的距离可由 0.65mm 到 1mm 。一般常规使用两个相邻样本的距离为 0.8mm 。为避免石蜡的破裂，在阵列块的边缘留出足够的空间是很重要的。一般推荐留出 2.5-3mm 边缘。

（四）制作微阵列

    将空白石蜡受体块放在溶器内，拧紧螺丝以防止其滑动。其次，该石蜡块表面应与基座平行。容器内的受体块紧紧地固定在安置杆内。开始阵列前，应先在受体阵列块上制作一个洞，这时，将测微器调至零。用小针制作该孔。首先，调节深度阻止钮，并拧紧螺母以使针停止在准确的深度上。该深度以在脱水盒容器表面上 0.5-1mm 比较理想。用手将针按下去，当深度钮阻止其运动时，用针柄将针旋转大约 45 o。这有助于从受体块上获得石蜡（筒）芯，然后，解除下压力，则弹簧将针拉上。针管将针变成空心，将石蜡芯丢进一个小篮内。注意：小管心针与小针是相匹配的，在制作阵列过程中的任何时候都不应去掉针管，因为它们始终浮在组织块的上面，除非它们被主动按下。供体（标本）块桥入在阵列块容器上方，移动转动架两个可能位置将针进行水平运动，通过与转动架相连的 Z －板以进行垂直运动。

    将 HE 切片与其相应的组织块位置调准，并将该切片与组织块复合体放在取样桥的上面。使用一台双筒立体显微镜或放大镜以助于挑选或观看 HE 切片上预先标记好的取样区域。该复合体在取样针下移动，使用大针以获得样品。将 HE 切片拿掉，压下大针以获得样品。注意：深度控制钮不能阻止针移动到组织块的适当位置，应小心防止针进入太深。有人发现在针上作一个永久性标志以保持固定的取样深度。在样品获得后，将桥撤掉，然后将针按正直到针尖到达受体组织块的孔内，或者针尖稍微高出该平面。保持该位置的同时，管心针组织排空至小针制作的小孔内。

（五）微阵列块切片的制作

    切片前，应使阵列块的表面平整和光滑。将阵列块放置在一个温箱内（ 40 ℃） 10 － 15 分钟。当阵列块变暖后，用一个玻璃载玻片或其它光滑平面将其表面压平。这样处理后，阵列块就可以用来切片了。

DK-8D 型电热恒温水槽操作程序

1  在三只内胆分别加入清洁温水，然后浇上少量石蜡油。

2  按下相应各槽电源开类，控温仪面板上即有数字显示，表示电源接通。

3  把第一孔的温度调节旋钮按下不放，此时相应显示器显示的温度值为设定温度值，同时慢慢旋转温度调节旋钮，观察显示数值，选择所选设定温度。松开温度调节旋钮，此时相应显示器的温度值为测定温度值，加热指示灯亮，开始进入加热升温状态，一段时间后，当显示温度接近设定温度时，加热指示灯忽亮忽暗，反复多次。在一般环境温度下通电 90 分钟，孔内温度可保持稳定。

第二、三孔的温度调节可依次采用以上方法。

DYY- Ⅲ -6B 型稳压稳流电泳仪操作方法

1  首先确定仪器电源开关处于关位。

2  连接电源线，确定电源插座是否有接地保护。

3  将黑红两种颜色的电极线对应插入仪器输出插口，并与电泳槽同颜色插口连接好。 ( 如果发现电极插头与插口之间接触松，可以用小改锥将插头的簧片向外拨一下 ) 。

4  确定电泳槽中的试剂配制是否符合要求。

5  电压和电泳的调整：

本机电压调节旋钮和电流调节旋钮均有大致的刻度指示。该指示可以作为预调值供使用者选择。

例 1 ：当需要输出电压恒定在 300V ，并且希望电流不超过 250mA 时，可以先将电压调节旋钮调至 300V 处，将电流调节旋钮调至 250mA 处，然后开启电源开关，输出电压将指示在 300V 左右，电流则应该在 250mA 以下的某一个值 ( 该值受缓冲液电阻值影响，是不确定的 ) 。在正常情况下，恒压指示灯亮，这种状态说明预置值与实际操作的结果是相符的。如果出现实际电压达不到 300V ，而电流已经达到 250mA ，且恒流灯亮，这说明缓冲液的电阻值较低，一种情况是缓冲液配制不当，另一咱情况是预置不当，此时应根据情况作相应调整。

例 2 ：如果需要恒流输出 200mA ，而电压不希望超过 500V ，则应将电流调节旋钮调至 200mA 处，将电压调节旋钮调至 500V 处，然后开机，正常时应该恒流灯亮，电流指示在 200mA 左右，而电压值是在 500V 以下的某一个值 ( 该值同样受缓冲液电阻影响 ) 。如果出现恒压灯亮，而电流达不到 200mA ，则一种情况是缓冲液电阻太大，另一种是预置不当，需要根据情况重新调整。

6  本机可以在工作时随时调整输出电压和电流。如果不熟悉如何预置电压电流，可以先确定是恒压输出，还是恒流输出，如果是恒流输出，则将电流调节为 0 ，将电压调节至最大，然后开机，此时缓缓调节电流调节旋钮，直到所需值。如果是恒压输出，则将电压调节为 0 ，将电流调节至最大，然后开机，缓缓调节电压旋钮至所需值。总之，电源在任何情况下只能稳一种参数，且电压电流之间的关系符合欧姆定律。

7  时钟调整：

本机时钟具有停电记忆功能，一次调整后可长期保存设置。

(1) 时间的调整

改变时间只须按下“快进”或“慢进”键，即可直接调整时间。

计时器采用 24 小时显示方式。

(2) 定时调整

按下“定时”键，此时显示的时间即是定时时间。如要改变定时时间，要同时再按“快进”或“慢进”键，

达到所需时间松开按键即可。到点时，蜂鸣器便会发出继续声响，通知使用者到时，但不关机。此时只需

按下“止闹”键，蜂鸣器便会停闹。

使用者可根据电泳的情况自行关机。

注意事项：

1  本机有输出短路保护功能，但短路时间不宜过长，否则易使仪器发热烧坏。

2  本机输出电压较高，工作时人体不得与电泳介质直接接触，以免触电。同时仪器输出端也不要与其它带电设备相连。

3  本机有两组并联输出插口，可以同时接两个电泳槽，但要求这两槽的电流之和不超过仪器的最大值。此时最好采用稳压输出，以减少两槽之间的相互影响。

4  仪器使用环境应清洁，注意勿使电质溶液进入仪器内部。

5  本机电源插座上方是保险管座盒。当使用中发现仪器的保险管烧毁时，一般情况是仪器内部发生故障，应予以检修，不要盲目更换保险管。本仪器保险管规格为Φ 5 × 20 ㎜ 4A 。

使用中发现异常中 ( 如有异味 ) 应即关机检查。如果是仪器有故障，请与我厂联系修理事宜。

OLYMPUS 倒置显微镜照相使用方法

1 ．打开电源开关 ON ，放上细胞标本。

2 ．相机上胶卷，相机开关自动 A 。( 注：手动是 M )(OFF 是关相机快门 ) 。

3 ．调整显微镜上放光源于小处，调至 0 ， @ 光成八角形， 使上方光源调于大处。

4 ．将物镜下大盘至“ CT ”处，转动大盘上的刻度成 相差最好，这时刻度不能再动。

5 ．可转动大盘于 1 × ( 没有放大 ) 、1.5 × ( 放大 1.5 倍 )

QL-901 型旋涡混合器操作方法

1  接通 220V 交流电源，旋涡混合器面板上小型换向开类向上处于连续旋涡状态，相应的 LED 指示灯亮；向下即处于点动状态，在点动旋涡时相应的 LED 指示灯亮。

2  换向开关处于连续档；将需要混合的液体装入溶器 ( 试管及其它与工作台直径相容器 ) 手持容器往下按的轻重、能使被混物发生不同程序的混合。

3  换向开关处于点动档：手持容器轻按工作台皮碗，旋涡混合器即开始工作，移去容器，混合器工作自动停止。

4  容器中混物的体积，一般以不超过容器容积的 1/3 为佳。容积一般不超过 10 毫升。

发生停机故障时，一般应断开电源，检查熔丝是否烧断。若非熔丝烧断而发生停机故障，应送我厂修理。

ZT-12 生物组织自动脱水机使用说明

一、水箱内水位标是否在正常位置

二、启电源总开关

三、编程

1 ．累加时间

例：第一缸时间为 1:30 ，第二缸时间为 2:00 ，第三缸为 1:30 ┅┅ 到第十一缸。

1）  按下“编程”键，显示屏应显示“--:--”若不是则按“清程”，若是则调“时增”“分增”使显示屏为“ 1:30 ”后按“存储”，再“寻程”显示屏为“--：--”调“时增”“分增”使显示为“ 3:30 ”再后“存储”，“寻程”调“时增”“分增”使显示为“ 5:00 ”“存储” ┅┅以此类推，共编 11 个程序后按“运行”、“记忆”。

2）  按“校时”键，使显示为“ 0:00 ”按“存储”再按“运行”再按“工作”（手动开关均应弹起）。

2 ．北京时间

例：上午 11:00 开机，第一缸时间为 1:30 ，第二缸为 2:00 ┅┅到第十一缸。

1）  按下“编程”键，显示屏应显示“--：--”若不是则按“清程”，若是则调“时增”、“分增”使显示屏为“ 12:30 ”后按“存储”，“寻程”调时间显示为“ 14:30 ” ┅┅以此类推，共编 11 个程序后按“运行”、“记忆”。

2）  按“校时”为实际时间，如 11:00 开机，则按“时增”“分增”使显示为“ 11:00 ”并按“存储”、“运行”再按“工作”（手动开关均应弹起）。

四、延时功能

1 ．按“编程”再“寻程”至显示为“ RO ：--”按“时增”显“ RI ：--”为一天，“ R2 ：--”为 2 天，再按“存储”按“运行”。

2 ．按下“工作”键后，按“延时”键，指示灯闪烁，邮电局已自动延时。

五、注意

1 ．工作时，手动开关均应弹起，只有“运行”及“记忆”、“工作”键按下。

2 ．工作完成后，吊臂返回第一缸，一定要落下底缸，关机后除“记忆”键外，其余开关均应弹起。

3 ．若长时间不用时（一个月以上），“记忆”键应断开，免损伤电瓶。

4 ．每次工作前观察是否需要加水，加水后不要随意搬动机器。

5 ．不得用手按压吊臂，以免折断。

奥林巴斯 BX61 生物显微镜及 PM30 照相装置简单使用步骤

一．明视场观察

1 ．打开电源控制盒上的电源开灯；

2 ．打开显微镜光源开关；

3 ．将 LBD 滤光片打入光路；

4 ．按光源亮度调节按钮，使亮度达到合适的水平；

5 ．按手动控制器上的按钮，使显微镜光路在明场“ BF ”的状态；

6 ．将标本放在载物台上，按控制器上的按钮，选择合适的物镜；

7 ．按载物台上下调节按钮，使标本初步聚焦；

8 ．再调节微调，使标本聚焦清楚。

二．荧光观察

1 ．关闭明视场光源；

2 ．打开汞灯电源开关；

3 ．根据不同的荧光染料选择相应的激发组块，按手动控制器上的按钮，使其进入光路；

4 ．将标本放在载物台上，按控制器上的按钮，选择合适的物镜；

5 ．按载物台上下调节按钮，使标本初步聚焦；

6 ．再调节微调，使标本聚焦清楚。

三．照相 ( 荧光及明场 )

1 ．首先使标本准确聚焦；

2 ．装好胶卷；

3 ．打开照相装置控制盒电源开关；

4 ．明场照相时，在控制盒选择“ AUTO ”，荧光照相时选择“ FL-AUTO ”；

5 ．明场照相时，必须将 LBD 滤光片打入光路；

6 ．将观察筒光路转换拉杆全部拉出；

7 ．在明场时，调节调焦目镜，使镜内的双十字线看清楚，再调节显微镜微调，使标本像也看清楚。如需荧光照相，不必重新调节；

8 ．明场照相时，按显微镜左边的“照相电压”按钮，使光源亮度达到照相的要求；

9 ．明场照相时，注意照相控制盒上的暴光时间显示，如在 0.5 秒内属正常，否则调节暴光补偿按钮，使暴光时间达到 0.5 秒内；

10 ．荧光照相时，当标本面积小于 0.1% 时，必须调节暴光补偿按钮，向“ 4 ” 的方向调节；

11 ．按暴光按钮“ EXPOSE ”。

超纯水器操作规程

1  开机，屏幕出现“ Standby ”。

2  按住“ Operate ”键两秒钟，出现“ Pre oporate ”。

3  按下出水阀（黑色扳手），待由阻率达到 18.2 时即可取水。

4 关机，按“ Operate ”键两秒，待出现“ Standby by ”时，关机。

台式冷冻离心机（ Biofinge 15R ）操作程序

1  接通电源，无需开关。

2  据各人实验要求设定温度、转速及时间三种条件。三种条件各有设定键即“ set ”，按下“ set ”即进入设置状态，然后按右侧的“十”或“一”键来调节各项数值的大小。

3  按“ lid ”键即打开离心机顶盖。

4  将已平衡好的离心管对称置于离心机内。

5  稍用力按顶盖，使顶盖完全合拢，按“ start ”键离心开始，起直至时间结束。

6   按“ lid ”键，打开顶盖，取出样品。

7  合上顶盖（需继续使用）或敞开顶盖（不需继续使用）。

8  拔掉电源（结束使用）。

9  登记使用情况。

Ks/1.7 程序降温仪操作规程

1  将主机及计算机置 On 位置。

2  当降温仪之液氮罐压力较低时，需加压，手黄灯亮，一定压力时，灯灭。

3  将样品置于隆温仪中，根据需要设定降温仪程序。

4  运行主机，按 Run 。

5  程序降温仪运行到开始温度后，灯亮，控制器提示 (5 分钟左右 ) ，加样。

6  运行控制器，继续运行程序。

7  程序运行完成后，提示信号 ( 较长时间灯阀 ) 出现，按 Stop 。

8  移出样品。

9  再次运行主机，将降温仪运行至环境温度，有提手灯。

10 按压 Stop 。

11 关机或继续运行。

12 排气阀压力表降至 0 时， 30 分钟移出降温仪，干净保存。

消火栓使用说明

一、实验室贯彻消防以预防为主的方针，做到人员离开，关掉所有电源的习惯。

二、万一实验室发生火灾，首先先关掉所有电源，疏散工作人员离开。

三、发生规模较小的火灾，打开消火栓门，拧开小阀门，抽出黑色排水管，对准火源灭火。

四、较大规模的火灾，首先取下小铁锤砸掉红色报警启动开关玻璃，用力按下启动开关，然后接上白色排水管，打开大阀门，抽出白色排水管，对准火源灭火。

电热三用水箱 DS- Ⅱ 使用方法

1 ．首先按下列程序装好“ L ”型玻璃温度计。 ( 本品为玻璃制品、运输易碎、故改为附件包装。 )

(1) 将主体前面的表罩卸掉。

(2) 将箱内温度计保护罩卸掉。

(3) 将温度计慢慢插入，并自里面套上胶圈。

(4) 将温度计保护罩及表罩上好拧紧，不得漏水。之后，即可工作。

2 ．使用时必须首先加水，最低水位不得低于电热管以上 10mm ( 因水位过低将导致电热管表面温度过高而烧毁。 )

3 ．接通电源。

4 ．作消毒用时，将开关置于标有“消毒”字样的位置，黄色指示灯亮，表示正在加热，约 20 分钟左右开锅。

5 ．作恒温和水浴用时，首先要把水加足。然后将开关置于标有“消毒”字样的位置，黄灯亮表示电源接通，再将开关置于标有“恒浴”字样的位置，调节温度控制器选定所需温度。当温度计达到所需要的温度时，则黄、绿灯交替亮熄，此时绿灯表示恒温，黄灯表示加热，稍待数分钟后即能自动控制。自加水通电至恒温约 2 小时左右。

注意事项：

1 ．在未加水以前切勿接通电源以防电热管烧坏；

2 ．箱外壳必须有效接地线。

高速冷冻离心机操作程序（ AvantiJ-25 ）

1  样品称平。

2  打开电源开关。

3  离心选项。

离心转头（ ROTOR 10 ）置于 JA

离心转速（ SPEED RPM/PCF ）自定。

离心时间（ TIME HR ： MIN ）

离心温度（ TEMP ℃ ）

4  踩脚踏打开离心机面盖。

5  拧开转头上盖，放入样品离心管，拧紧转头大、小手柄。

6  关上离心机上盖，按 START, 离心机启动开始运转。

7  离心时间结束，离心机自动停转，取出离心管。

8  关闭离心机电源。

9  登记使用情况。

注意事项：

1  样品离心管必须严格称平。

2  离心速度不得超过本离心机最大转速。

3 离心结束必须清洁、干燥离心室。

凝胶成像系统基本使用说明

1  请勿用污染手套接触成像系统及电脑操作系统 ;

2  用干净保鲜膜将凝胶包好 , 放于仪器成像台上 , 操作时用手直接操作 , 勿戴手套 ;

3  打开电脑 , 打开 IQuant Capture 300 软件 ; 点击软件上 Acquire 键 ;

4  打开成像仪电源 , 选择 2 号滤光片 (filter wheel position);

5  打开 Transillumination UV 紫外开关 ;

6  在电脑上 , 点击软件中 preview 键 , 进行图像预览 ;

7  调整图像大小及焦距 , 点击 capture 进行采集图像并保存 , 关闭软件 ;

8  关闭凝胶成像系统 UV 灯 , 关闭系统电源 , 然后关闭电脑 ;

9  清理仪器中凝胶 .

双向电泳的操作方法

1. 将玻璃板洗净、晾干、固定。
2. 按照实验要求，配制不同浓度的分离胶。将分离胶注放玻璃板夹层中，上部用 MilliQ 水、乙醇或水饱和正丁醇封面，保持胶面平整，待分离胶聚合后，配制浓缩胶。
3. 配制好浓缩胶后，倒去分离胶表面的少量水分，然后灌入浓缩胶，插入点样梳。
4. 将待分析鉴定的蛋白质样品，加入等体积 2 × SDS-PAGE 上样缓冲液， 100 ℃ 水浴 3-5 分钟 ( 插入冰浴冷却后加样 ) 。
5. 在电泳槽加入电泳缓冲液后，小心拔去上样梳，然后用注射器洗干净加样孔，检查一下电路连通状况 ( 注意正负级 ) ，然后关闭电源。用微量加样器分别吸取待分析样品，根据蛋白质浓度和加样孔体积决定加样量。
6. 加样完毕后，接通电源，起始时用的低电流或低电压，待样品在浓缩胶部分浓缩成一条线后，再加大电流 ( 或电压 ) ，待溴酚蓝指示剂达到底部边缘时即可停止电泳。
7. 电泳结束后，轻轻撬开两层玻璃，取出凝胶，并切角以作记号 ( 戴手套，防止污染胶面 ) 。
8. 染色。

注意事项：

1  玻璃板一定要清洗干净，否则在染色时会不必要的凝胶背景。

2  过硫酸铵 (Ap) 要新鲜配制。 40% 的过硫酸铵储存于冰箱中只能使用 2-3 天，低浓度的过硫酸铵溶液只能当天使用。

3  蛋白质从浓缩胶部分到分离胶部分转移为避免点脱尾和损失高分子量蛋白，应缓慢进行 ( 场强小于 10V/cm) 。